丙二醛（MDA）測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
本試劑盒是在國(guó)內(nèi)外眾多測(cè)試方法的基礎(chǔ)上改進(jìn)的一種微量、快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、對(duì)操作
人員健康無(wú)損害的測(cè)試方法。通過(guò)測(cè)試可反映出血清（漿）、乳汁等細(xì)胞外液、紅細(xì)胞、白細(xì)
胞、培養(yǎng)細(xì)胞以及各種動(dòng)植物的細(xì)胞水平及亞細(xì)胞水平的脂質(zhì)過(guò)氧化物的量。
一、測(cè)定意義：
機(jī)體通過(guò)酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸
（polyunsaturated fatty acid，PUFA），引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過(guò)氧化物。
如：醛基（丙二醛 MDA）、酮基、羥基、羰基、氫過(guò)氧基或內(nèi)過(guò)氧基，以及新的氧自由基等。脂
質(zhì)過(guò)氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑，即非自由基性的脂類(lèi)分解產(chǎn)物，而且通過(guò)鏈?zhǔn)?br />或鏈?zhǔn)街ф湻磻?yīng)，放大活性氧的作用。因此，初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致很多脂類(lèi)分解產(chǎn)物的形
成，這些分解產(chǎn)物中，一些是無(wú)害的，另一些則能引起細(xì)胞代謝及功能障礙，甚至死亡。氧自
由基不但通過(guò)生物膜中多不飽和脂肪酸（PUFA）的過(guò)氧化引起細(xì)胞損傷，而且還能通過(guò)脂氫過(guò)
氧化物的分解產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。因而測(cè)試 MDA 的量常?？煞从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間
接地反映出細(xì)胞損傷的程度。
MDA 的測(cè)定常常與 SOD 的測(cè)定相互配合，SOD 活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的
能力，而 MDA 的高低又間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，通過(guò) SOD 與 MDA 的結(jié)果
分析有助于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、藥理及工農(nóng)業(yè)生物試劑的發(fā)展。
二、測(cè)試原理：
過(guò)氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛 （MDA）可與硫代酸 縮合，形成紅色產(chǎn)物,
在 532nm 處有大吸收峰。因底物為硫代酸（Thibabituric Acid TBA）所以此法稱(chēng) TBA
法。
∗
) (TBA
三、 測(cè)試所需儀器設(shè)備：
可見(jiàn)光分光光度計(jì)，可調(diào)到 95℃左右的恒溫水浴箱或沸水鍋，離心機(jī)。
四、試劑盒組成與配制（100T/96 樣）：
試劑一：液體 20ml×1 瓶，室溫保存。（天冷時(shí)會(huì)凝固，每次測(cè)試前適當(dāng)水浴加溫以加速溶解，
直至透明方可應(yīng)用）。
試劑二：液體 12ml×1 瓶，用時(shí)每瓶加 340ml 雙蒸水混勻,4℃冷藏（注意不要碰到皮膚上）。
試劑三：粉劑×1 支，用時(shí)將粉劑加入到 90℃～100℃的熱雙蒸水 60ml 中，(在溶解過(guò)程中可
適當(dāng)加熱)，充分溶解后用雙蒸水補(bǔ)足至 60ml 再加冰醋酸 60ml，混勻，配好的試劑
避光冷藏。（冰醋酸自備）
標(biāo)準(zhǔn)品：10nmol/ml 四乙氧基丙烷 5ml×1 瓶，4℃冷藏。
［注］：冰醋酸（分析純，乙酸濃度≥99.5%）;測(cè)試盒冷藏至少可保存一年。
五、試劑盒組成與配制(50T/48 樣)：
試劑一：液體 10ml×1 瓶，室溫保存。（天冷時(shí)會(huì)凝固，每次測(cè)試前適當(dāng)水浴加溫以加速溶解，
直至透明方可應(yīng)用）。
試劑二：液體 6ml×1 瓶，用時(shí)加 170ml 雙蒸水混勻，4℃冷藏。（注意不要碰到皮膚上）。
試劑三：粉劑×1 支，用時(shí)將粉劑加入到 90℃～100℃的熱雙蒸水 30ml 中，(在溶解過(guò)程中可
適當(dāng)加熱)，充分溶解后用雙蒸水補(bǔ)足至 30ml 再加冰醋酸 30ml，混勻，配好的
試劑避光冷藏。（冰醋酸自備）
標(biāo)準(zhǔn)品：10nmol/ml 四乙氧基丙烷 5ml×1 瓶，4℃冷藏。