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      大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒試劑組成

      點擊次數(shù):1100     更新時間:2017-05-10

      大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒基本信息 

      腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)可分為TNF α和TNFβ兩種,前者來自單核巨噬細胞,后者由活化T細胞產(chǎn)生,是具有重要生物活性的細胞因子。存在于細胞上的TNF 受體主要有兩種:TNFRⅠ和TNFRⅡ,血清中存在的是可溶性的TNFR(s TNFRⅠ, s TNFRⅡ),它們的相互作用不僅對多種腫瘤細胞有細胞毒作用,還與炎癥和發(fā)熱反應、關節(jié)炎、敗血癥及多發(fā)性硬化等疾病有密切關系。

      TNF-α是一種單核因子,主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生,LPS是較強的刺激劑。IFN-γ、M-CSF、GM-CSF對單核細胞/巨噬細胞產(chǎn)生TNF-α有刺激作用,而PGE則有抑制作用。前單核細胞系U937、前髓細胞系HL-60在PMA刺激下可產(chǎn)生較高水平的TNF-α。T淋巴細胞、T細胞雜交瘤、T淋巴樣細胞系以NK細胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B細胞產(chǎn)生TNF-α。此外,中性粒細胞、LAK、星狀細胞、內皮細胞、平滑肌細胞亦可產(chǎn)生TNF-α。

      大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒試劑組成

      (1)包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):

        Na2CO3 1.59克

        NaHCO3 2.93克

        加蒸餾水至1000ml

      ?。?)洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M

        KH2PO4 0.2克

        Na2HPO4·12H2O 2.9克

        NaCl 8.0克

        KCl 0.2克

        Tween-20 0.05% 0.5ml

        加蒸餾水至1000ml

       (3)稀釋液:

        牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

        加洗滌緩沖液至100ml

        或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

      ?。?)終止液(2M H2SO4):

        蒸餾水178.3ml,逐滴加入硫酸(98%)21.7ml。

      ?。?)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

        0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml

        0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml

        加蒸餾水50ml。

      (6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

        TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml

        底物緩沖液(PH5.5) 10ml

        0.75%H2O2 32μl

      (7)ABTS使用液:

        ABTS 0.5mg

         底物緩沖液(PH5.5) 1ml

        3%H2O2 2μl

      (8)抗原、抗體和酶標記抗體。

      (9)正常人血清和陽性對照血清。

      elisa試劑盒中有哪些器材

      (1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。

      (2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。

      (3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。

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