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      改良吉姆薩染色

      服務(wù)介紹:
      組織切片及細(xì)胞涂片經(jīng)吉姆薩染色后,各類細(xì)胞由于其成份的差異而呈現(xiàn)出不同的著色,從而達(dá)到分辨各類細(xì)胞的目的。本項(xiàng)目為改良吉姆薩染色,適用于血涂片,肺泡灌洗液細(xì)胞滴片,骨髓細(xì)胞涂片,石蠟切片和冰凍切片的染色,染色目的多為觀察各類炎性細(xì)胞的特征及數(shù)量分布。

      產(chǎn)品型號(hào):

      更新時(shí)間:2025-02-03

      服務(wù)介紹:

      組織切片及細(xì)胞涂片經(jīng)吉姆薩染色后,各類細(xì)胞由于其成份的差異而呈現(xiàn)出不同的著色,從而達(dá)到分辨各類細(xì)胞的目的。本項(xiàng)目為改良吉姆薩染色,適用于血涂片,肺泡灌洗液細(xì)胞滴片,骨髓細(xì)胞涂片,石蠟切片和冰凍切片的染色,染色目的多為觀察各類炎性細(xì)胞的特征及數(shù)量分布。

      實(shí)驗(yàn)流程:

      涂片/組織切片-改良吉姆薩染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢

      結(jié)果判讀:

      細(xì)胞類型

      細(xì)胞特征及染色結(jié)果

      成熟紅細(xì)胞

      圓餅狀,粉紅色,無(wú)核

      中性粒細(xì)胞

      細(xì)胞核藍(lán)色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質(zhì)淡紫紅色

      嗜酸性顆粒

      細(xì)胞核藍(lán)色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質(zhì)內(nèi)深紅色顆粒

      嗜堿性粒細(xì)胞

      細(xì)胞核藍(lán)色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質(zhì)內(nèi)藍(lán)紫色顆粒

      淋巴細(xì)胞

      細(xì)胞較小,核藍(lán)色小而圓;細(xì)胞質(zhì)較少呈藍(lán)紫色

      單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞

      細(xì)胞較大,細(xì)胞核藍(lán)色大而圓;細(xì)胞質(zhì)淺藍(lán)紫色

       

      樣本準(zhǔn)備方法及送樣運(yùn)輸要求(為保證染色成功率,血液、肺泡灌洗液、骨髓樣本建議客戶按以下方法自行涂片固定后送樣):

      1.涂片的制作方法:

      1.1 血涂片制備:

      1)取新鮮血液(若用抗凝管收集的血液,放置最好不要超過(guò)24h,否則血液中白細(xì)胞的數(shù)量以及種類會(huì)明顯減少),選用干凈的粘附玻片,用移液槍吸取10ul的血液,滴加在玻片的一側(cè)(一般都是磨砂對(duì)側(cè))

      2)再取一片輔助玻片(也可選用蓋玻片,依據(jù)個(gè)人手的力道習(xí)慣選擇),以45°角將其寬邊靠近血液,血液沿著接觸邊緣向兩邊暈開,當(dāng)兩邊都到達(dá)邊緣時(shí),輕輕地穩(wěn)健且勻速地推向磨砂面一側(cè),進(jìn)行涂片,然后快速果斷地拿走載玻片??梢娡科孜卜置?,厚薄均勻。(一般情況下,涂抹速度力道適中的話,取走玻片時(shí)載玻片上的血幾乎無(wú)殘留,且涂抹出的血涂片無(wú)明顯細(xì)胞破碎,變形。在顯微鏡下可觀察到細(xì)胞呈單個(gè)緊密排列,整體比較均勻。)

      3)自然晾干后,用甲醇浸泡固定15min,自然晾干后4℃保存運(yùn)輸。

      1.2 肺泡灌洗液和骨髓涂片制備:

      1)取細(xì)胞懸液,2800r 4℃離心5min去上清。若沉淀紅色較多,則需要用紅細(xì)胞裂解液(G2015)裂解紅細(xì)胞。細(xì)胞沉淀加入紅細(xì)胞裂解液200ul,渦旋混勻,放在冰上裂解2min后加入1ml PBS終止裂解。2800r 4℃離心5min去上清后加PBS重懸。若沉淀紅色不多,則不需要裂解紅細(xì)胞,直接棄上清液,加PBS重懸。根據(jù)細(xì)胞沉淀量對(duì)應(yīng)加入PBS:

      ①若肉眼觀察無(wú)明顯細(xì)胞沉淀,直接加入50ul PBS,用移液槍吹打混勻后,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

      ②若細(xì)胞沉淀量為綠豆大小,加入200ul PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取50ul,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

      ③若細(xì)胞沉淀量很多,黃豆大小或更大,加入1ml PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取150ul,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的大圓圈中(最大長(zhǎng)邊約5cm,最大短邊約2cm的橢圓)。在顯微鏡下觀察細(xì)胞量的多少,若還是過(guò)厚,再用PBS對(duì)倍稀釋該細(xì)胞懸液,直至在顯微鏡下觀察到細(xì)胞量涂布均勻。

      2)用移液槍將細(xì)胞懸液鋪滿整個(gè)圓圈,涂片放置自然晾干(因細(xì)胞未經(jīng)固定,不可通過(guò)烘箱加快晾干)。

      3)將晾干后的涂片放入丙酮中浸泡固定1min,自然風(fēng)干,4℃保存運(yùn)輸。

      2. 石蠟切片常溫運(yùn)輸,冰凍切片-20℃運(yùn)輸。

      樣本種類

      預(yù)處理過(guò)程

      固定條件

      保存運(yùn)輸條件

      備注

      血液

      5-10ul血液涂片

      甲醇固定15min后自然晾干

      4℃保存運(yùn)輸

      血液要用抗凝管采集,取血后立即涂片固定

      肺泡灌洗液,骨髓

      50-150ul細(xì)胞懸浮液涂片

       

       

      丙酮固定1min后自然晾干

       

      4℃保存運(yùn)輸

       

      樣品中紅細(xì)胞較多需要裂解紅細(xì)胞,取樣后立即涂片固定



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