| 豚鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒 |
| 本試劑盒含量是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知待測物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系 |
| 問題1：如果我們代測的樣本是組織樣本，請問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少? |
| 答：一般我們試劑盒的組織勻漿，都是按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液可以選取生理鹽水，也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol. |
| 問題2：請問試劑盒在zui后計(jì)算的時(shí)候,用一般試劑盒測要測組織蛋白濃度，zui后計(jì)算出來的,我們的試劑盒是不是也需要這樣操作?具體怎么計(jì)算? |
| 答：對(duì)于組織樣本來講，我們建議做蛋白定量.然后把測得的結(jié)果比上蛋白定量的結(jié)果,zui終得到每g蛋白中含有指標(biāo)的量,這樣更為準(zhǔn)確!如果不做蛋白定量的話，就是得到每g組織中含有量! |
| 問題3：請問我訂購了你們的試劑盒，但是樣本是分批次收集的，我可以分批次實(shí)驗(yàn)嗎。 |
| 答：可以的，我們的試劑盒橫條是可拆卸的，試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存，下次可以繼續(xù)使用，但是建議是拆封之后一個(gè)月內(nèi)用完。 |
| 問題4：請問各種標(biāo)本的處理方式，你可以發(fā)給我一下嗎？ |
| 答：當(dāng)然可以。標(biāo)本要求如下： |
| 在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。 |
| 液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。 |
| 1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。 |
| 2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。 |
| 3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參? 照此實(shí)行。 |
| 4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。 |
| 5.培養(yǎng)細(xì)胞：檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 |
| 6.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 |
| 7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融. |
| 8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 |
| 問題5：麻煩把試劑盒的具體操作步驟發(fā)給我一下，謝謝！ |
| 答：好的，詳細(xì)的操作步驟如下： |
| 1. 加樣：標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)定5個(gè)濃度點(diǎn)10個(gè)孔，每個(gè)濃度設(shè)定平行孔，加入50微升不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，空白孔設(shè)定1個(gè)孔加入50微升蒸餾水（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔，在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 |
| 2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 |
| 3. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。 |
| 4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 |
| 5. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 |
| 6. 溫育：操作同3。 |
| 7. 洗滌：操作同5。 |
| 8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. |
| 9. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 |
| 10. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 |
| 豚鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒 |
| 問題6：試劑盒操作過程中有什么注意事項(xiàng)嗎？ |
| 答：有的，具體的注意事項(xiàng)如下： |
| 1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 |
| 2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 |
| 3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。 |
| 4． 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 |
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 |
| 6． 底物請避光保存。 |
| 7． 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). |
| 8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 |
| 9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 |
| 11. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。 |
| 問題7：請問操作完之后，應(yīng)該怎么計(jì)算呢？ |
| 答：你好，操作完成之后，詳細(xì)的計(jì)算方式是：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。 |
| 問題8：請問你們試劑盒的性能如何？ |
| 答：試劑盒性能的性能我們是通過幾個(gè)數(shù)值反應(yīng)的：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11% |
| 豚鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒 |
| 信帆生物公司主要代理產(chǎn)品： |
| ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。 |
| 培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。 |
| 血清：胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。 |
| 生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品：進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品. |
| 抗體：一抗,二抗，流式抗體等。 |
| 放免檢測服務(wù)：進(jìn)口放免檢測服務(wù)，國產(chǎn)放免檢測服務(wù)，進(jìn)口美國鳳凰等放免檢測服務(wù)。 |
| 實(shí)驗(yàn)室代測服務(wù)：放免代測，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細(xì)胞染色代測，生化實(shí)驗(yàn)代測等。 |
| 相關(guān)產(chǎn)品： |
| 雞α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 |
| 雞白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 |
| 雞白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 |
| 雞病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒 |
| 雞白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 |
| 雞白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 |
| 雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 |
| 雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 |
| 雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 |
| 雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 |
| 雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒 |
| 雞堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 |
| 雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 |
| 雞可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 |
| 雞表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 |
| 雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 |
| 雞生長因子(GH)ELISA試劑盒 |
| 雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA 試劑盒 |
| 雞透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 |
| 雞硫酸類肝素(HS)ELISA 試劑盒 |
| 雞催乳素(PRL)ELISA 試劑盒 |
| 雞促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 |
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