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      丁酰膽-堿酯酶(B-CHE)測定試劑盒 生化試劑

      丁酰膽-堿酯酶(B-CHE)測定試劑盒,膽-堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成 TNB 黃色化合物,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽-堿的數(shù)量可以反應(yīng)膽-堿酯酶的活力。

      產(chǎn)品型號:

      更新時間:2025-01-23

      丁酰膽-堿酯酶(B-CHE)測定試劑盒

      (比色法)

      一、測定原理:

      丁酰膽-堿酯酶水解丁酰膽-堿生成膽-堿及乙酸,膽-堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成 TNB 黃色化合物,根據(jù)

      顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽-堿的數(shù)量可以反應(yīng)膽-堿酯酶的活力。

      二、試劑組成及配制(50T/24 )

      試劑一:標(biāo)準(zhǔn)品,粉劑×3 支,4℃保存。

      1μmol/ml 標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液的配制:取標(biāo)準(zhǔn)品一支加生理鹽水 10ml 混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。

      試劑二:底物粉劑×2 支,用時每支粉劑加生理鹽水 20ml,現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后 4℃保存兩周。

      試劑三:顯色劑貯備液,3ml×1 支,4℃保存,用時以生理鹽水 19 稀釋,配成顯色應(yīng)

      用液。需多少配多少,也可以一次配成 30ml,避光冷藏。保存期 3 個月。

      試劑四:抑制劑,液體×1 支。打開后可以裝在空的小塑料瓶內(nèi)(附空瓶一只),室溫保存。

      試劑五:透明劑,液體 6ml×1 支。室溫保存。

      生理鹽水:60ml×2 瓶,室溫保存。

      三、操作過程:

      1、樣本前處理:

      組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=19 的比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下

      機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清,即為 10%勻漿上清液;

      血清樣本:取抗凝全血 10001500 轉(zhuǎn)/分鐘,離心 10 分鐘,取上層血漿。也可測血清,測時將血清(漿)

      用生理鹽水 119 稀釋;

      全血樣本: 0.1ml 抗凝全血加生理鹽水至 10ml 199 稀釋,取 a ml(一般取 0.1ml)檢測,每個樣本

      取樣前必須充分混勻。

      2、操作步驟

      111.png

       

      3、參考取樣量:

      ①、大鼠血清測試前用生理鹽水 20 倍稀釋,參考取樣量為 3050μl

      ②、10%腦組織勻漿的參考取樣量為 3050μl。

      ③、199 稀釋后的全血稀釋液取 0.1ml。

      四、定義及計算公式:

      1、組織勻漿中丁酰膽-堿酯酶的計算:

      定義:每毫克組織蛋白樣本在 37℃保溫 6 分鐘,水解反應(yīng)體系中 1μmol 基質(zhì)為 1 單位。

      222.png

       

      五、本法優(yōu)點:

      1、靈敏度高。微量樣品即可測出丁酰膽-堿酯酶的水平。

      2可以分型。另有配套試劑盒可測乙酰膽-堿酯酶。

      3、方法簡便快速,準(zhǔn)確穩(wěn)定。

      4、不需氣相色譜等高級儀器,只要一般分光光度計即可。

      丁酰膽-堿酯酶(B-CHE)測定試劑盒 

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