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      超微量 Na +K+–ATP 酶測試盒 生化試劑

      超微量 Na +K+–ATP 酶測試盒,將培養(yǎng)細(xì)胞消化,離心,棄上清,留下層細(xì)胞,每管加 0.2~0.3mL 生理鹽水或勻漿介質(zhì)制備成 10 7 /cm3 細(xì)胞懸液,即 10 7 /mL,再進(jìn)行破碎。

      產(chǎn)品型號:

      更新時間:2025-01-24

      超微量 Na +K+–ATP 酶測試盒

      (測組織、培養(yǎng)細(xì)胞)

      一、試劑組成與配制:

      11.png

       

      二、樣本的前處理:

      1、組織的前處理:(組織勻漿上清液的制備參考實驗方法學(xué))

      準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(mL)=1:9

      比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下機械勻

      漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液(即 10%的勻

      漿上清液),再用生理鹽水 10 倍稀釋成 1%,同時用考馬

      斯亮藍(lán)試劑測定組織蛋白(試劑本所有售)。如果預(yù)試結(jié)

      果太高,再將 1%的組織勻漿稀釋成不同濃度再進(jìn)行預(yù)試

      再決定取樣濃度

      2、培養(yǎng)細(xì)胞的前處理:將培養(yǎng)細(xì)胞消化,離心,棄上清,留

      下層細(xì)胞,每管加 0.20.3mL 生理鹽水或勻漿介質(zhì)制備

      10 7 /cm3 細(xì)胞懸液,即 10 7 /mL,再進(jìn)行破碎。破碎細(xì)胞

      的方法有三種:①、用勻漿器勻漿。②、用超聲粉碎器粉

      碎。③、反復(fù)凍溶 3 (第③種方法有時會影響酶活力)。

      制備好的細(xì)胞懸液不需要離心,同時用考馬斯亮蘭試劑測

      定組織蛋白(試劑本所有售)。再將細(xì)胞勻漿液稀釋成不

      同濃度進(jìn)行預(yù)試,根據(jù)預(yù)試結(jié)果決定取樣濃度。

      [ 1]:在測試加樣前要搖勻后取樣。

      [ 2]:不可用磷酸鹽緩沖液或含磷的試劑作為樣本勻漿

      或稀釋樣本。

      [ 3]:預(yù)試結(jié)果將吸光度值(A 測定—A 對照)控

      制在 0.2 左右為宜。

      22.png

       

       超微量 Na +K+–ATP 酶測試盒

       

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